swant 300說明書
產(chǎn)品名稱：鈣結合蛋白D28K小鼠單克隆抗
英文名稱：Monoclonal anti Calbindin D-28k
貨號： 300
批號：07 (F)
外觀：凍干粉.
溶解：200 µl / 500 µl 或 1 ml 雙蒸水
規(guī)格：
貨號 | 規(guī)格 |
swant-300-200µl | 200ul |
swant-300-500µl | 500ul |
swant-300-1ml | 1ml |
產(chǎn)品描述：
鈣結合蛋白 D-28k單克隆抗體是將小鼠骨髓瘤細胞與來自腸道[1]的鈣結合蛋白-28k免疫小鼠脾細胞雜交產(chǎn)生的小鼠IgG1。鈣結合蛋白D-28k的單克隆抗體（McAB），是EF-hand家族與鈣調(diào)素和肌鈣蛋白C相關的鈣結合蛋白。
反應種屬：
WB：人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和雞。
經(jīng)WB免疫印跡驗證McAB 300（鈣結合蛋白 D-28k）能測除魚以為的人、猴、豚鼠、兔、大鼠、小鼠和雞的組織提取物（見圖1）。并且不與鈣網(wǎng)膜蛋白及其他鈣結合蛋白產(chǎn)生交叉反應。凝膠電泳顯示McAB 300（鈣結合蛋白 D-28k）特異性結合位點為D-28k（MW 28'000，IEP 4.8）。放射免疫法檢測鈣結合蛋白D-28k，靈敏度為10ng/反應，親和力為1.6x 1012 L/M。
經(jīng)測試應用：
WB, IHC-P/Fc, IF-P/Fc，ELISA，RIA
WB： 免疫印跡； IHC ：免疫組織化學；IF：免疫熒光，ELISA：酶聯(lián)免疫；RIA：放射免疫
以下方法廠家已用于驗證抗體的特異性和效價評價：（a）免疫組化/免疫熒光（HRP或生物素-親和素標記法檢測4%多聚甲醛固定的冰凍組織切片/石蠟組織切片；（b）免疫印跡WB/ELISA；（c）放射免疫分析。
稀釋比例
免疫組化： 1:5'000 - 1:10'000 生物素標記法。
WB： 1:100 - 1:1'000 （HRP）。
建議根據(jù)實驗內(nèi)容選擇合適的方法。
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儲存：
短期保存：- 20°C，長期保存：- 80°C，近期頻繁使用保存于 4°C (增加0.01% 疊氮鈉)。避免反復凍融。建議分裝小份儲存。
特異性表達：
免疫組織化學染色表明鈣結合蛋白 D-28k特異表達在所有脊椎動物（魚類除外）的腦、腎和胰腺的組織切片（漂片/貼片法）
腦組織提取物WB 檢測
1 2 3 4 5 6 7
28 Kda
圖1 ：不同種屬腦組織勻漿液的WB檢測結果。上樣順序依次為：1 小鼠；2 大鼠；3 豚鼠；4 兔子；5 食蟹猴；6 斑馬魚；7 重組鈣結合蛋白D-28k。WB結果表明，在所有物種中（斑馬魚除外），僅特異檢測到28kDa的條帶。
鈣結合蛋白D-28k基因敲除小鼠的免疫組織化學（IHC）研究
CB300
（鈣結合蛋白 D-28k）于正常腦組織的神經(jīng)元高表達（圖2a）而在鈣結合蛋白D-28k基因敲除小鼠腦組織的相同區(qū)域未見陽性表達（圖2b）。
DG Py | DG Py |
圖2a: McAB300的免疫組織化學染色 正常小鼠腦組織海馬齒狀回（DG）區(qū)及錐體細胞中可見強陽性表達。100 X鏡下。 | Fig 2b: McAB 300 免疫組化染色鈣結合蛋白D-28k基因敲除小鼠，與對照組相比，相同腦海馬區(qū)未見陽性表達。血管部位可見由小鼠二抗產(chǎn)生的非特異性表達。DG: 齒狀回, Py:錐形細胞 100 X鏡下 |
參考文獻
- Celio M.R. et al., Cell Calcium 11:599-602, 1990
- Kretsinger R.H. (1981) Neurosci. Res. Progr. Bull. 19/8, MIT-Press
- Garcia-Segura L.M. et al. (1984) Brain Rews. 296: 75-86.
- Airaksinen M.S., et al, (1997), PNAS 94(4) : 1488-1493
